半尺寸高性能PCR仪

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Cycler IIIC是门设计成48孔的个人使用的PCR仪，即只有全尺寸孔板（96孔）的*半。与Cycle III 不同的是，当使用48孔板时，升温速度可达到4.5 oC/。

该仪器的自动调节式加热盖（100oC *115oC）的设计降低了样品蒸发的风险，可开启关闭。此加热盖只有当加热块温度设置*于35°C 才会运作。

强大的编程方式让用户易懂直观。几种用户常用的方法已创建成模板，使用户轻易设置*为复杂的协议程序。屏幕上显示升降温速度，使用户能够监视仪器运作的状况。

Cycler IIIC（原文是否漏了C）*新的功能具备校准功能。将仪器与校准探头连接，几分钟内便可进行校准。

Mullis初使用的DNA聚合酶是大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 的Klenow片段，其缺点是:

①Klenow酶不耐高温， 90℃会变性失活，每次循环都要重新加。

②引物链延伸反应在37℃下进行，容易发生模板和引物之间的碱基错配，其PCR产物特异性较差，合成的DNA段不均一。此种以Klenow酶催化的PCR技术虽较传统的基因扩增具备许多突出的优点，但由于Klenow酶不耐热，在DNA模板进行热变性时，会导致此酶钝化，每加入一次酶只能完成一个扩增反应周期，给PCR技术操作程序添了不少困难。这使得PCR技术在一段时间内没能引起生物医学界的足够重视。

1988年初，Keohanog改用T4 DNA聚合酶进行PCR，其扩增的DNA段很均一，真实性也较高，只有所期望的一种DNA段。但每循环一次，仍需加入新酶。

1988年Saiki 等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌thermus aquaticus 中提取到一种耐热DNA聚合酶。 此酶具有以下特点:①耐高温，在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%，在93℃下反应2h后其残留活性是原来的60%，在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。②在热变性时不会被钝化，不必在每次扩增反应后再加新酶。③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率，增加了扩增长度2.0Kb。由于提高了扩增的特异性和效率，因而其灵敏性也大大提高。为与大肠杆菌多聚酶IKlenow片段区别，将此酶命名为TaqDNA多聚酶Taq DNAPolymerase。此酶的发现使PCR广泛的被应用。

更新时间：2024/4/19 11:52:20